去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用，对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响．分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge，AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹，可以分析获得其沉降系数、摩尔质量、流体力学半径、结合常数等水力学和热力学性质，进而判断膜蛋白-去垢剂复合物的均一性及聚合状态．本文以嗜热菌来源的ATP结合转运蛋白(ABC transporter)TmrAB作为研究对象，利用分析超速离心技术结合分子排阻层析和冷冻电镜负染技术，研究其均一性、聚合状态以及去垢剂与膜蛋白的摩尔比．结果显示，在8倍临界胶束浓度(critical micelle concentration，CMC)的DDM条件下，TmrAB性质均一，并以异二聚体的单体形式存在，DDM与TmrAB的摩尔比为116∶1．本研究表明，分析超速离心技术是一种测定膜蛋白分子质量、研究膜蛋白聚合状态的可靠手段．
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分析超速离心技术研究膜蛋白TmrAB
本站小编 Free考研考试/2022-01-02
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