海南杜鹃热诱导基因RhRCA1启动子的克隆与功能分析

李铮, 刘冰, 周泓, 王秀云(), 夏宜平()

浙江大学农业与生物技术学院,观赏植物基因组与基因工程实验室,杭州 310058

收稿日期:2020-09-04出版日期:2021-03-25发布日期:2021-04-02
通讯作者:王秀云,夏宜平E-mail:wxy.550@163.com;ypxia@zju.edu.cn

基金资助:国家自然科学基金项目(31901356);中国博士后科学基金项目(2018M632484)

Isolation and Function Analysis of the Promoter of a Thermal Inducible Gene RCA1 in Rhododendron hainanense

LI Zheng, LIU Bing, ZHOU Hong, WANG Xiuyun(), XIA Yiping()

Genomics and Genetic Engineering Laboratory of Ornamental Plants,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China

Received:2020-09-04Online:2021-03-25Published:2021-04-02
Contact:WANG Xiuyun,XIA Yiping E-mail:wxy.550@163.com;ypxia@zju.edu.cn

摘要/Abstract

摘要： 为了阐述RhRCA1基因的调控机制,以海南杜鹃（Rhododendron hainanense）3年生扦插苗为材料,分析RhRCA1高温响应和组织表达特性;并克隆获得RhRCA1的启动子序列,将该启动子分别驱动荧光素酶报告基因在烟草中瞬时表达、GUS报告基因在拟南芥中稳定表达,分析该启动子活性、组织特异性和热诱导性。结果显示:（1）25 ℃条件下,RhRCA1表达量极低,37 ℃处理后其表达量显著升高,呈现典型的热诱导特性,并且RhRCA1在绿色组织中的表达量显著高于非绿色组织,呈现组织特异性;（2）获得的启动子长1 624 bp,其含有多个非生物胁迫响应、光响应、组织特异性等相关元件;（3）构建RhRCA1启动子和萤光素酶融合的植物表达载体,在烟草叶片中瞬时表达,荧光成像结果表明RhRCA1启动子能强烈响应高温胁迫;（4）构建RhRCA1启动子和GUS融合的植物表达载体,转化拟南芥植株筛选至T₃代,GUS染色结果显示,高温能显著诱导RhRCA1启动子在拟南芥子叶、成熟叶、茎、萼片、果荚等绿色组织中的表达。研究结果表明RhRCA1启动子是1个兼具高温诱导型和组织特异性的启动子,可应用于植物抗逆基因工程,提高植物在高温胁迫下的抗性。
中图分类号:
S685.21

引用本文

李铮, 刘冰, 周泓, 王秀云, 夏宜平. 海南杜鹃热诱导基因RhRCA1启动子的克隆与功能分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(3): 566-576.
LI Zheng, LIU Bing, ZHOU Hong, WANG Xiuyun, XIA Yiping. Isolation and Function Analysis of the Promoter of a Thermal Inducible Gene RCA1 in Rhododendron hainanense[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2021, 48(3): 566-576.





PDF全文下载地址:

http://www.ahs.ac.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=106962