卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入
符勇耀1，刘建玲1，朱艺勇1，徐文姬1，雷美艳2，杨利平1,*1长江师范学院现代农业与生物工程学院，重庆 408100；2重庆市药物种植研究所，重庆 408435
出版日期:2020-07-25发布日期:2020-07-25基金资助:国家自然科学基金青年基金项目（31500245）；重庆市科技局基础研究与前沿探索项目（cstc2019jcyj-msxmX0014）；重庆市教委科学技术项目（KJQN201801428）；重庆市科研机构绩效激励引导专项（cstc2018jxjl-jbky130015）；重庆市人力社保局2017年出站留（来）渝博士后科研项目（0108/01096101）；长江师范学院引进人才科研项目（2017KYQD63）；长江师范学院生物工程与现代农业专业群科研项目（CSZKY1813）Construction of Transformation System and Integration of LrCCoAOMT Gene into Lilium lancifolium
FU Yongyao1，Liu Jianling1，ZHU Yiyong1，XU Wenji1，Lei Meiyan2，and YANG Liping1,*1School of Advanced Agriculture and Bioengineering，Yangtze Normal University，Chongqing 408100，China；2Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation，Chongqing 408435，China
Online:2020-07-25Published:2020-07-25摘要/Abstract
摘要： 以卷丹（Lilium lancifolium Thunb.）无菌小鳞片为试材，通过切片处理、优化农杆菌侵染浓度与时间以及重悬液和共培养基成分，构建农杆菌介导的高效遗传转化体系。结果表明，MS + 1.5 mg ? L-1 6-BA + 0.5 mg ? L-1 NAA + 30 g ? L-1蔗糖是切片芽分化的最佳培养基，添加100 mg ? L-1抗坏血酸能有效抑制褐化并促进不定芽增殖。MS + 2.0 mg ? L-1 NAA + 30 g ? L-1蔗糖是生根诱导的最佳培养基。抗生素敏感性测试发现，培养基中添加Kan 100 mg ? L-1或Hyg 75 mg ? L-1 结合Cef 400 mg ? L-1适宜抗性筛选。GUS染色分析表明，以去除大量元素的改良MS + 100 μmol ? L-1 AS和去除大量元素的改良MS + 1.0 mg ? L-1 6-BA + 1.0 mg ? L-1 NAA + 100 μmol ? L-1 AS为重悬液和共培养基，将切片在农杆菌菌液浓度OD600为0.4，侵染15 min，获得81.72% 瞬时转化率和25.2% 稳定遗传转化率。将岷江百合LrCCoAOMT转化卷丹，分子检测和GUS染色分析表明已获得转基因阳性株系。
中图分类号:
S 682.2
引用本文
符勇耀1，刘建玲1，朱艺勇1，徐文姬1，雷美艳2，杨利平1,*. 卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入[J]. 园艺学报, 2020, 47(7): 1345-1358.
FU Yongyao1，Liu Jianling1，ZHU Yiyong1，XU Wenji1，Lei Meiyan2，and YANG Liping1,*. Construction of Transformation System and Integration of LrCCoAOMT Gene into Lilium lancifolium[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2020, 47(7): 1345-1358.
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