‘伏令夏橙’原位转化体系的建立及优化
谢幸男*,杨 莉*,刘 范,田 娜,车婧如,靳三鹏,张永艳**,程春振**福建农林大学园艺学院,园艺植物生物工程研究所,福州 350002
出版日期:
2020-01-25发布日期:
2020-01-25基金资助:
福建省自然科学基金面上项目(2017J01615);福建省大学生创新训练项目(201810389094);福建省省级大学生创新创业训练项目(201910389149);福建省高原学科建设经费项目(102/71201801101);广东省科技计划项目(2016B020201006,2017A070702005);广西自然科学基金项目(2017GXNSFBA198055)Establishment and Optimization of Valencia Sweet Orange in planta Transformation System
XIE Xingnan*,YANG Li*,LIU Fan,TIAN Na,CHE Jingru,JIN Sanpeng,ZHANG Yongyan**,and CHENG Chunzhen**Institute of Horticultural Biotechnology,College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China
Online:
2020-01-25Published:
2020-01-25摘要/Abstract
摘要: 以‘伏令夏橙’实生苗为材料进行原位转化体系建立及优化。首先,研究侵染部位对原位转化效率的影响:使用带有PBI121载体的农杆菌分别侵染5周龄‘伏令夏橙’实生苗上胚轴切口、顶芽切口(保留/去除真叶)2次,共培养3 d后进行抗性筛选及暗处理,7周后提取叶片DNA用于转基因植株PCR鉴定;之后,以上胚轴切口作为侵染部位进一步研究苗龄对原位转化效率的影响。研究结果表明,5周龄上胚轴切口再生率为93.10%,转化率为20.68%;保留/去除真叶后侵染顶芽时,再生率分别为81.74%和94.55%,转化率分别为19.09%和17.82%;4周龄和6周龄上胚轴切口再生率为94.59%和91.50%,转化率为25.42%和19.36%。可见利用农杆菌介导的遗传转化法原位转化4周龄‘伏令夏橙’的上胚轴切口可获得较高的转化效率。原位转化操作简单、周期短、转化率高,在甜橙遗传育种研究中具有重要的应用价值。
中图分类号:
S 666.4
引用本文
谢幸男*,杨 莉*,刘 范,田 娜,车婧如,靳三鹏,张永艳**,程春振**. ‘伏令夏橙’原位转化体系的建立及优化[J]. 园艺学报, 2020, 47(1): 111-119.
XIE Xingnan*,YANG Li*,LIU Fan,TIAN Na,CHE Jingru,JIN Sanpeng,ZHANG Yongyan**,and CHENG Chunzhen**. Establishment and Optimization of Valencia Sweet Orange in planta Transformation System[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2020, 47(1): 111-119.
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