miR-27b-3p调控SMAD1对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭作用的影响
马青源,蒲沛东,韩飞,王超,朱洲均,王维山,史晨辉石河子大学医学院, 新疆维吾尔自治区 石河子 832000
发布日期:2020-07-10通讯作者:史晨辉. E-mail:1512905535@qq.com基金资助:国家自然科学基金(81660374;81772407;81760404;31760270)Effect of miR-27b-3p regulating SMAD1 on osteosarcoma cell proliferation, migration and invasion
MA Qingyuan, PU Peidong, HAN Fei, WANG Chao, ZHU Zhoujun, WANG Weishan, SHI ChenhuiMedical College of Shihezi University, Shihezi 832000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Published:2020-07-10摘要/Abstract
摘要： 目的 寻找并验证miR-27b-3p和SMAD1的关系,探讨miR-27b-3p对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移作用的影响,为骨肉瘤靶向治疗提供理论依据。 方法 采用生物信息学方法预测候选靶基因;应用双荧光素酶报告实验确定miR-27b-3p和SMAD1靶向关系;采用qRT-PCR法选择SAOS-2骨肉瘤细胞系。采用miR-27b-3p转染SAOS-2细胞后,分为miR-27b-3p inhibitor组、空白对照组和阴性对照组。采用MTT、Transwell迁移和侵袭实验检测miR-27b-3p对SAOS-2细胞的影响;采用Western blotting法检测沉默miR-27b-3p后SMAD1的表达量。 结果 生物信息学检测显示,miR-27b-3p与SMAD1-UTR存在结合位点;双荧光素酶报告实验显示,miR-27b-3p inhibitor组SMAD1的表达量高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),SMAD1是miR-27b-3p的靶基因。SAOS-2细胞MTT、Transwell迁移实验和侵袭实验结果均显示,miR-27b-3p inhibitor组与空白对照组和阴性对照组细胞数相比降低,差异有统计学意义(P<0.05),miR-27b-3p inhibitor组细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低。miR-27b-3p inhibitor组与阴性对照组SMAD1蛋白表达量相比明显降低(P<0.05)。 结论 miR-27b-3p可以通过调控SMAD1的表达促进骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭作用。miR-27b-3p可能在骨肉瘤细胞中起着促癌基因作用。
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