高血脂症是指血液中胆固醇、甘油三酯等脂类物质异常升高，可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，通过降胆固醇药物调节血脂是目前预防和治疗高血脂症的有效方法。辛伐他汀（Zocor）是一种重要的降胆固醇药物，其工业生产包括三个步骤：土曲霉发酵生产洛伐他汀，碱水解洛伐他汀制备中间体monacolin J，化学或生物方法将monacolin J转化为辛伐他汀。但传统碱水解生产monacolin J工序相对复杂、成本昂贵且环境污染较大。使用特异且高效的洛伐他汀水解酶进行酶促合成是绿色生产monacolin J的可替代方法之一。
　　青岛能源所吕雪峰研究员带领的微生物代谢工程研究组（http://mme.qibebt.ac.cn/）致力于他汀类降血脂药物的生物合成研究（Metab Eng. 2017； Biotechnol J. 2018；ACS Synth Biol. 2019）。近期，该研究组进一步揭示了高效特异洛伐他汀水解酶PcEST的催化机制及其结构-功能关系，相关工作发表在Journal of Biological Chemistry期刊上。
　　研究人员成功解析了4个高分辨X射线晶体结构，包括PcEST单体蛋白，PcEST-monacolin J复合物、PcEST与底物类似物辛伐他汀的复合物、以及PcEST失活突变体S57A与底物洛伐他汀的复合物。基于结构分析，结合突变、质谱和ITC等多种生化分析方法，研究人员发现：Ser-57（亲核试剂）-Tyr-170（广义碱）-Lys-60（广义酸）催化三联体、活性位点周围的氢键网络和特定的底物结合通道共同决定了PcEST高效特异地水解洛伐他汀生成monacolin J，并回答了为什么PcEST能够高效特异地水解洛伐他汀而不能水解辛伐他汀。在此基础上，研究人员基于结构分析，进一步对PcEST进行了酶工程改造，成功设计改造获得了可溶性表达和热稳定性改善的PcEST突变体D106A。这些性质的改良意味着D106A突变体在monacolin J工业生产中可能具有更广阔的应用前景。
　　这是首次描述洛伐他汀水解酶催化机理和结构-功能关系的报道，该研究成果为进一步的洛伐他汀水解酶的筛选、酶工程改造和工业应用提供了基础和理论指导。
　　上述研究工作得到了国家自然科学基金、山东省自然科学基金、中国科学院科技服务网络计划（STS计划）和山东省人才工程的共同资助。（文/图 梁雅静）
　　原文链接：https://www.jbc.org/content/295/4/1047.full?sid=ef7355fd-94ac-4e04-9c10-4185b4252f95
　　
　　洛伐他汀水解酶PcEST高效特异地催化洛伐他汀水解，而不能水解辛伐他汀
　　活性中心的关键残基用棍棒形式显示， 氢键网络用黑色虚线标示，参与构成PcEST 特定底物结合通道的区域用浅粉红色展示。

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