- 姓名:冯景
- 性别:男
- 出生年月:1970.7
- 专业技术职务:副教授
- 专业:临床检验诊断学
- 导师层次:硕士生导师
- 导师类别:专业学位型
- 最后学历:贵阳医学院检验系硕士研究生学历,华中科技大学同济医学院检验系博士学位
- 工作单位:南方医科大学附属奉贤医院检验科
- 办公室电话:02157422836
- 电子邮件:fengjing8801530@163.com
2、临床分子生物学
2、CpGislandmethylatorphenotypeofmultigeneinserumofsporadicbreastcarcinoma.TumorBiology,2010.
3、HypermethylationofTumorSuppressorGenesBRCA1,p16and14-3-3sinSerumofSporadicBreastCancerPatients,Onkologie,2007.
临床实验室管理,人民军医出版社,2012,3月。
2、MiR-15b/EzH2相互作用对乳腺癌PcG靶基因甲基化的影响,上海市自然基金项目,2012-2015,25万元。
本人目前可支配总经费:100万元
科学意义:1本研究方法的建立使更多的甲基化研究者从大量的、昂贵的、不稳定的预试验中解脱出来;2为探讨乳腺癌发生发展表遗传学机制奠定了基础,并为乳腺癌治疗的靶向逆转提供了新的位点;3为乳腺癌的早期诊断、指导病理分型和预测预后提供了新的指标;4以血清作为检测样品即无创性检测,减轻了病人的痛苦,并为寻找乳腺癌新的基因特异标志物提供了新思路和方法。
在国内外同行中所处的水平,具备的优势和特色:(1)本成果所用的方法基于对国外甲基化特异PCR改进和优化的方法,是目前检测CpG岛内CpG位点甲基化最简便的方法,国外己有甲基化修饰试剂盒,但价格昂贵,重复性不好,且不易掌握,国内目前一般使用国外试剂盒来研究甲基化。本课题对DNA甲基化修饰过程加以优化,并对甲基化特异PCR全程进行控制,建立了稳定而通用的甲基化修饰方法,我们用亚硫酸氢钠修饰的DNA样品,可用来进行多种抑癌基因的MSP,成本大大降低,并且重复性很好,修饰后的DNA样品于-20℃可保存6个月;(2)设计引物也是MSP研究方法的一个关键,设计好的引物最好用引物软件如Primer5.0从理论上推测其扩增效率,对于扩增效率低于30%的引物要进行优化,方法是:在核心启动子区域前后反复调整甲基化前导引物扩增起始点,以期使引物扩增效率增高,降低扩增难度,从而可提高PCR产量。选用针对富含CG等复杂二级结构模板的特殊缓冲液,降低了模板的变性温度,有利于PCR扩增;(3)对于微量样品如血清DNA量较少的标本,采用加入鲑鱼精DNA或糖原(约1μg)可富集血清DNA,有利于沉淀DNA(加入载体后轻轻晃动Ependorf管可见絮状DNA富集现象)。本课题首次检测出了散发性乳腺癌血清DNA存在甲基化的BRCA1基因,且与肿瘤组织甲基化有良好的一致性(同质性),因血清取材方便,甲基化的BRCA1其有希望成乳腺癌新的特异肿瘤标志物;(4)国外学者指出了BRCA1在乳腺癌中存在错位表达的现象,未探讨机理,本研究发现BRCA1表达定位结果不一致的原因可能与抗体针对的蛋白靶向表位不同有关。国外学者研究发现卵巢癌的血浆存在甲基化的BRCA1,而尚无学者研究散发性乳腺癌患者。此外,本研究也证实乳腺癌变过程各个阶段均存在甲基化的BRCA1,且模式不同。因此,本研究水平已经达到国际领先水平。