摘要： 【目的】本研究克隆亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis卵黄原蛋白(vitellogenin, Vg)基因，分析其表达模式，旨在探究UV-A胁迫对亚洲玉米螟Vg基因表达及生殖力的影响。【方法】采用RT-PCR和RACE技术克隆亚洲玉米螟Vg基因的全长，并用生物信息学方法分析其特征；利用RT-qPCR检测亚洲玉米螟不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、蛹和成虫)、雌成虫不同组织(头、足、表皮、卵巢、中肠和脂肪体)中和雌成虫在UV-A胁迫不同时间(0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5和4 h)下该基因的相对表达量。测定UV-A照射不同时长(0, 1, 2, 3和4 h/d)后亚洲玉米螟成虫的生殖及F1代发育情况。【结果】克隆获得亚洲玉米螟Vg基因的序列，命名为OfVg(GenBank登录号: MK782978)。该基因全长5 760 bp，开放阅读框(ORF)长5 331 bp，编码1 776个氨基酸，蛋白相对分子量为202.10 kD，等电点为9.06。OfVg包含Vg-N, DUF 1943D和VWD 3个功能结构域，无跨膜区结构。系统发育分析表明，OfVg与鳞翅目其他昆虫的Vg的亲缘关系最近。发育表达谱表明，OfVg基因在雌成虫中表达量显著高于其他龄期的表达量，且在雌虫羽化24 h时OfVg表达量最高；组织表达谱表明，OfVg基因在雌成虫脂肪体中特异表达。UV-A照射能诱导雌成虫OfVg的表达，随着照射时间的延长，其表达量先下降再快速上升，在照射3.5 h时其表达量最高，然后骤降；UV-A处理1, 2和3 h/d雌成虫的产卵量显著增加，且F1代幼虫发育历期显著延长。【结论】OfVg基因在亚洲玉米螟不同发育阶段、雌成虫不同组织中和UV-A照射不同时间的雌成虫中差异表达。本研究为深入研究UV-A胁迫对亚洲玉米螟发育和繁殖的影响奠定了基础。
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亚洲玉米螟卵黄原蛋白基因的克隆、表达谱及对UV-A胁迫的响应
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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