摘要： 【目的】本研究旨在克隆棉铃虫Helicoverpa armigera c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)基因，并对其进行序列和表达模式分析，探讨该基因在棉铃虫生长发育及响应UV胁迫方面的作用。【方法】利用RT-PCR与RACE技术克隆棉铃虫JNK基因，并利用生物信息学方法对其编码的氨基酸序列进行分析；采用实时荧光定量PCR技术检测其在棉铃虫不同发育阶段 (卵、1-6龄幼虫、蛹、雌雄成虫)、成虫不同组织(去除触角和复眼的头、胸、腹、触角、复眼、足、翅、中肠、卵巢)中及雌成虫在UV-A照射不同时间(0, 30, 60, 90, 120和150 min)下的相对表达量变化。【结果】克隆获得一个棉铃虫JNK基因并命名为HaJNK (GenBank登录号: MH719009)，其cDNA序列全长为2 431 bp，开放阅读框(ORF)长1 191 bp，编码396个氨基酸，编码蛋白质的相对分子量为45.01 kD，等电点为6.35，无跨膜结构，无信号肽。系统进化分析显示，棉铃虫HaJNK与其他昆虫JNK具有很高的同源性。发育阶段表达分析表明，HaJNK在棉铃虫卵期表达量最高；组织特异性分析显示该基因在成虫复眼、胸部及卵巢部位特异性表达。UV-A照射能诱导棉铃虫雌成虫体内HaJNK的表达，随着照射时间的延长，其表达量呈现先升高后降低的趋势，在照射60 min时表达量达到峰值。【结论】HaJNK在棉铃虫不同龄期、成虫不同组织和UV-A照射不同时间的雌成虫中差异表达，提示其在响应UVA胁迫的分子机制中具有重要意义。
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棉铃虫c-Jun氨基末端激酶基因的克隆、表达谱及对UV-A胁迫的响应
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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