环境DNA（eDNA）技术是近年来新兴的一种野外水生生物调查方法。本研究旨在设计一组香港瘰螈（Paramesotriton hongkongensis）特异的引物和TaqMan探针并确立此eDNA方法在水样中的实用性，以期进一步调查其野外种群分布。测定11种瘰螈物种的线粒体细胞色素b（Cyt b）基因序列，然后使用Primer Express 3.0软件设计引物和TaqMan探针。通过比对NCBI基因库及进行退火温度梯度测试，验证引物和TaqMan探针的特异性。通过测试不同浓度的引物和TaqMan探针，优化qPCR扩增效率。然后检测养殖不同数量香港瘰螈的水缸水体中eDNA，以评估已建立的qPCR方法灵敏度。同时，测定香港瘰螈eDNA降解速度，以估计其在水中的持续时间。实验结果显示，本研究所设计的引物和探针只对香港瘰螈呈阳性扩增，而对同属的其他10个物种均呈阴性。优化的qPCR效率为93.9%、最低检测浓度为10 DNA拷贝数。已建立的qPCR方法能灵敏地检测出在养殖1只香港瘰螈24 h实验水缸水体的DNA拷贝数为（13.56 ± 3.35）/ml水样。另外，降解实验发现，采用0.45 μm孔径滤膜已有效检测香港瘰螈eDNA并能监测15 d。本研究成功设计并建立了一种能在水环境中检测香港瘰螈是否存在的eDNA技术，以期应用于野外考察。
PDF全文下载地址:
http://dwxzz.ioz.ac.cn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=20002&flag=1&journal_id=dwxb&year_id=2020
删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
香港瘰螈eDNA引物和TaqMan探针的设计与确认
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/香港 设计 实验 技术 测试
领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
优惠券领取后72小时内有效，10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材，产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频，无论您是考研复习、考证刷题，还是考前冲刺等，不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...考试优惠券 本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19动物剥制标本修复技术的改进
动物标本资源越来越珍贵，其修复技术需要不断更新。本文针对动物剥制标本出现的干裂破损、脱毛、褪色、霉烂、虫蛀现象，针对不同类群的动物标本修复作了技术探索，包括使用新型修补材料、新的补色方法，以及新的防霉、除虫技术等。与以前的修复技术相比，新技术充分利用了新材料和新方法，操作简单易行。通过介绍几个修复案 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于GIS技术对虎病例的回顾性分析
疫病对珍稀濒危物种虎的（Pantheratigris）生存构成重大威胁。先前的许多研究都将疫病的出现与社会经济、环境和生态因素联系起来，但还没有研究明确分析这些因素与虎病例发生之间的关系。本研究从虎病例的分类统计情况、空间分布情况、时间相关性三个方面分析了1909至2019年间全球范围内的551个虎 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于红外相机技术对陕西老县城国家级 自然保护区大中型兽类及林下鸟类资源分析
兽类和鸟类多样性的监测是生物多样性保护中的重要一环。2017年4月至2018年5月，按照网格法在位于陕西省西安市周至县的老县城国家级自然保护区布设了36台红外相机，对保护区内大中型兽类和林下鸟类多样性进行调查。累积7835个相机工作日，获得野生动物独立有效照片1915张，共鉴定出32种鸟类和兽类物种 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03实验树鼩肠道螺杆菌属细菌特征分析
近年来，树鼩（Tupaiabelangeri）作为一种新型的实验动物被广泛应用于生物医学研究的各个领域。本研究组前期的研究结果显示，螺杆菌属（Helicobacter）是树鼩肠道微生物群落中相对丰度最高的一类细菌，但其具体的细菌种类和结构特征仍然不清楚。因此，本研究将开展实验树鼩肠道中螺杆菌属细菌的 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于正交试验设计开展的黑猩猩 食物丰容效果研究
基于正交试验设计，对上海动物园8头黑猩猩（Pantroglodytes）进行食物丰容（木丝、麻袋和竹筒）对取食行为影响的研究，利用正交试验设计试验因素和水平，采用所有事件取样法记录丰容前后黑猩猩取食行为的持续时间。结果表明，通过正交试验设计，能够有效对不同的试验方案进行排序。本研究中，对黑猩猩取食行 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于红外相机技术对佛坪国家级自然保护区 大熊猫季节性空间分布与活动模式的研究
2015年1月至2017年12月，在陕西佛坪国家级自然保护区海拔1200~2500m的57条大熊猫（Ailuropodamelanoleuca）活动频繁的巡护样线上，布设130台红外相机。累计红外相机有效工作日100685d，共拍摄到大熊猫有效独立照片1831张。将红外相机拍摄的有效照片和相机工作日 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03马卵母细胞孤雌激活与体细胞核移植技术
在马（Equuscaballus）的繁殖和非繁殖季节，本研究探讨马扩展型（Ex）和紧凑型（Cp）卵丘-卵母细胞复合体（COCs）卵母细胞的孤雌激活效率。在繁殖季节，探讨马驹和成年马成纤维细胞核移植（SCNT）的成功率。孤雌激活实验结果显示，在繁殖季节，发育到2-细胞、4-细胞和桑椹胚的比例，扩展型（ ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03树鼩原代皮肤成纤维细胞的分离培养技术
建立稳定的树鼩（Tupaiabelangeri）皮肤成纤维细胞的体外培养体系，可为有关此类细胞的实验和疾病树鼩细胞模型提供技术支持。取树鼩大腿内侧皮肤用组织块贴壁法和胶原酶Ⅰ消化法分离皮肤细胞，胰蛋白酶差别消化法纯化细胞；用MEM（10%FBS）完全培养基和含低血清生长添加物（LSGS）的培养基培养 ...中科院地质与地球物理研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03应用EPG技术分析不同品种苜蓿对苜蓿斑蚜的抗性
摘要：【目的】明确苜蓿斑蚜Therioaphistrifolii对不同品种苜蓿Medicagosativa的取食行为，探明抗蚜因子和抗虫位点，筛选抗蚜苜蓿品种。【方法】利用刺吸电位技术(electricalpenetrationgraph,EPG)记录苜蓿斑蚜成蚜在10个苜蓿品种上的取食行为，并基于 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03昆虫口腔分泌物效应子及其在害虫防治中基于RNAi技术的应用展望
摘要：昆虫口腔分泌物(oralsecretion,OS),又称返吐液，是昆虫唾液腺分泌的唾液和肠道分泌物的混合液。昆虫取食寄主植物过程中，OS随之分泌至植物中，并影响植物的防御反应。RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是研究昆虫基因功能有价值的反向遗传学工具，也是目前最有可能应用于 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03
