3-酮脂酰ACP还原酶(FabG)催化脂肪酸合成中的第一步还原反应，是细菌生长的关键酶之一. 恶臭假单胞菌在环境污染治理和工业聚羟基脂肪酸(PHA)的生产中，都具有重要的应用价值. 生物信息学分析显示，恶臭假单胞菌基因组编码6个FabG同源蛋白质，与大肠杆菌FabG相比较，PpFabG5序列相似性最高(76.5%)，其他几个PpFabG也都具有较高的序列相似性(约50%). 除PpFabG4之外，其他的同源蛋白质都具有催化活性位点和N端辅因子结合位点. 为研究恶臭假单胞菌中这6个FabG同源蛋白质的生物学功能，本文进行了异体遗传互补、体外酶学活性分析、体内基因敲除与突变株性状分析等研究. 结果显示，只有PpfabG1、PpfabG3、PpfabG5能恢复大肠杆菌fabG温度敏感突变株CL104在42℃时生长，其中PpfabG1互补株生长较弱. 而在体外活性检测中，PpFabG1、PpFabG3和PpFabG5在脂肪酸合成起始反应和延伸反应中都具有催化活性，但PpFabG1活性较弱，PpFabG6仅在起始反应中具有催化活性. PpfabG5是恶臭假单胞菌生长的必需基因，不能被敲除，而其他几个PpfabG基因敲除后不影响菌体的生长，突变株的脂肪酸组成与野生菌也无差异. 但PpfabG1、PpfabG2敲除后菌体的运动性下降，PpfabG3、PpfabG6突变影响了生物被膜的合成量，而PpfabG4、PpfabG6敲除突变株对H2O2的耐受性增强，表明这些基因具有不同的生理功能，可能在菌体的不同逆境中发挥作用.
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恶臭假单胞菌中3-酮脂酰ACP还原酶FabG5是脂肪酸合成关键酶
本站小编 Free考研考试/2022-01-02
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