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虎杖中一种新的2-吡喃酮合酶基因的克隆和功能研究

本站小编 Free考研考试/2022-01-02

4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮(2-吡喃酮)及其衍生物是一类重要的植物次生代谢产物,具有抗虫、抗真菌等功能,在工业上可用于生产可再生化学平台间苯三酚和1,3,5-三氨基-2,4,6-三硝基苯. 2-吡喃酮合酶(2PS),一种Ⅲ型聚酮合酶(PKSs),是合成2-吡喃酮的关键酶. 本研究以中药材虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc)为材料,从中分离鉴定了一种新的2-吡喃酮合酶(Pc2PS). Pc2PS与已知的几种2PSs的氨基酸序列相似性为54%~56%. 通过体外酶促反应鉴定功能发现,Pc2PS可以催化1分子乙酰-CoA与2分子丙二酰-CoA,缩合生成4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮;也可以只利用3分子丙二酰-CoA,以相同的效率缩合生成2-吡喃酮. 由此可以看出,乙酰-CoA存在与否并不影响该酶的催化效率. 随后,我们测定了Pc2PS以丙二酰-CoA为单一底物时的酶动力学参数. 虽然之前报道的2PSs也可以只利用丙二酰-CoA生成2-吡喃酮,但与Pc2PS不同的是,乙酰-CoA的缺失会大大降低催化效率. 另外,对Pc2PS基因的组织表达特异性检测结果表明,该基因主要在虎杖根中表达,在叶中的表达量很低. 本研究丰富了2PS的种类,并为2-吡喃酮的生物合成提供了基因资源.

PDF全文下载地址:

http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=20190037&flag=1&journal_id=pibbcn
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