为探讨miR-33s在核因子κB(NF-κB)抑制三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达及胆固醇流出中的作用，THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度脂多糖(LPS)处理，活化NF-κB，或以PDTC(NF-κB抑制剂)预处理细胞后再加入LPS，实时荧光定量PCR检测细胞miR-33s及其宿主基因胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)的表达，蛋白质印迹法检测SREBPs的蛋白质表达，染色体免疫共沉淀检测NF-κB p65与SREBPs启动子区结合情况；LPS处理基础上，转染miR-33s抑制物或miR-33s模拟物，RT-PCR检测ABCA1 mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测ABCA1蛋白水平，液体闪烁计数仪检测细胞内的胆固醇流出．结果显示，NF-κB活化促进miR-33s及SREBPs的表达，使用PDTC抑制NF-κB，细胞内miR-33s和SREBPs的表达下降；NF-κB p65可与SREBPs启动子区直接结合；转染miR-33s抑制剂后，NF-κB活化对ABCA1的抑制作用减弱，胆固醇流出增强；相反，转染miR-33s抑制物，NF-κB活化对ABCA1的抑制作用增强，胆固醇流出减弱．结果提示，NF-κB活化可促进miR-33s表达，抑制ABCA1及胆固醇流出．
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miR-33s在NF-κB抑制ABCA1表达及胆固醇流出中的作用
本站小编 Free考研考试/2022-01-02
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