柑橘叶斑驳病毒的RT-LAMP检测
黄爱军*,丁 敏,王 莹,苏华楠,易 龙赣南师范大学生命科学学院,国家脐橙工程技术研究中心,江西赣州 341000
出版日期:
2020-11-25发布日期:
2020-12-07基金资助:
江西省重点研发计划项目(20161ACF60016);江西省现代农业产业技术体系建设专项资金项目(JXARS-07);赣南师范大学研究生创新专项(YCX19A023);赣州市科技创新人才计划项目([2018]50)Establishment of RT-LAMP Assay for Detection of Citrus Leaf Blotch Virus
HUANG Aijun*,DING Min,WANG Ying,SU Huanan,and YI LongCollege of Life Sciences,Gannan Normal University,National Navel Orange Engineering Research Center,Ganzhou,Jiangxi 341000,China
Online:
2020-11-25Published:
2020-12-07摘要/Abstract
摘要: 建立了柑橘叶斑驳病毒(citrus leaf blotch virus,CLBV)的RT-LAMP(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification)检测方法,并对其灵敏度和准确性进行验证。根据CLBV的外壳蛋白序列设计引物,筛选出特异性较好的一组引物,进行扩增时间及温度等条件优化。优化后反应体系可在65 ℃条件下,60 min内完成扩增。所建立体系特异性好,灵敏度高,最低可从23.2 pg ? μL-1的模板中检测出CLBV,扩增结果可通过加入SYBR greenⅠ染料方法直接观察。用RT-LAMP方法对田间采集的120份柑橘样品进行检测,不同来源样品检出率在0 ~ 15%之间,与普通RT-PCR方法检出结果一致。
中图分类号:
S 666
引用本文
黄爱军, 丁 敏, 王 莹, 苏华楠, 易 龙. 柑橘叶斑驳病毒的RT-LAMP检测[J]. 园艺学报, 2020, 47(11): 2215-2222.
HUANG Aijun, DING Min, WANG Ying, SU Huanan, and YI Long. Establishment of RT-LAMP Assay for Detection of Citrus Leaf Blotch Virus[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2020, 47(11): 2215-2222.
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