摘要： 目的 探讨钙调蛋白（CaM）拮抗剂氯化卡咪唑铵（CMZ）在不同浓度Ca²⁺条件下，对CaM与心肌Ca_V1.2通道C末端CT1蛋白片段结合的抑制作用，为探究CaM拮抗剂调节细胞内Ca²⁺浓度的作用机制以及临床应用提供理论基础。方法 利用GST pulldown assay技术检测在不同Ca²⁺浓度（100 nmol/L和10 μmol/L）下，CMZ对CaM与CT1蛋白片段的结合的影响。用Scanwizard Bio系统扫描并数字化SDS-PAGE凝胶，用CS Analyzer软件定量灰度值，用SigmaPlot软件分析CaM与CT1蛋白片段结合的变化与趋势。结果 与对照组相比，在100 nmol/L和10 μmol/L Ca²⁺浓度下，CMZ可显著抑制CaM与心肌Ca_V1.2通道CT1蛋白片段的结合，且结合具有CaM浓度依赖性和Ca²⁺浓度依赖性。结论 CaM拮抗剂CMZ通过抑制CaM与心肌Ca_V1.2通道C末端CT1片段的结合，调节Ca²⁺通道活动。

氯化卡咪唑铵抑制钙调蛋白与心肌Ca_V1.2通道结合的作用

郝明杰, 孙伟楠, 苏敬阳, 郝丽英

中国医科大学药学院药物毒理学教研室, 沈阳 110122

收稿日期:2021-12-08发布日期:2022-11-09
通讯作者:苏敬阳E-mail:jysu@cmu.edu.cn
作者简介:郝明杰（1998-），女，硕士研究生.
基金资助:中国博士后科学基金（2021M693914）；辽宁省中央引领地方科技发展专项（2020JH6/10500022）；医学电生理学重点实验室（西南医科大学）开放基金（KeyME-2019-07）；大学生创新训练项目（202110159007）


关键词: 钙调蛋白拮抗剂, Ca_V1.2通道, Ca²⁺浓度, 心血管系统疾病
Abstract: Objective To investigate the inhibitory effect of calmidazolium chloride（CMZ），an antagonist of calmodulin（CaM），on the binding of CaM with CT1 protein motif at the C-terminus of the cardiac Ca_V1.2 channel using different concentrations of calcium ion（Ca²⁺）. The intent was to provide a theoretical basis for the regulatory mechanism of intracellular Ca²⁺ concentration by CMZ and clinical application.Methods A glutathione S-transferase pull-down assay detected binding of CaM to the CT1 protein motif 100 nmol/L or 10 μmol/L Ca²⁺ with or without CMZ.Results CMZ inhibited CaM binding to the cardiac Ca_V1.2 channel CT1 protein motif at both Ca²⁺ concentrations. CaM binding to CT1 in the presence of CMZ was reduced compared with CaM without CMZ. Binding was dependent on the concentrations of CaM protein and Ca²⁺. Conclusion CMZ inhibits the binding of CaM to CT1 of the cardiac Ca_V1.2 channel，thereby regulating the activity of L-type Ca²⁺ channels.
Key words: calmodulin antagonist, Ca_V1.2 channnel, Ca²⁺ concentration, cardiovascular diseases
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