姓名： 康然 性 别: 男 院 系： 第三临床医学院（江苏省中西医结合医院）
行政职务： 副主任 专业技术职称： 研究员 任职年月：2016-10

导师类别： 科学硕导 最后学历：博士研究生 最后学位： 博士
任硕导年月： 2018年9月 任博导年月： 是否院士： 否
是否国务院学科评议组成员： 否 毕业院校： 丹麦奥胡斯大学 毕业专业：
毕业时间： 办公电话： E-mail： kangran126@126.com
◇ 本人从事的主要研究方向特点、意义及水平及其他：
一、研究意义
围绕“提高纤维环损伤组织断面愈合质量”关键技术问题开展研究。拟利用天然生物交联剂获得组织断面接触稳定，并对比不同稳定条件下断面之间的愈合质量，阐明接触稳定性对纤维环愈合的影响，最终获得断面融合的解决途径。（1）阐明断面之间分子水平的连接可以达到力学稳定与力学刺激的统一，使MSC处于纤维环整体的应力环境之中，是诱导MSC向纤维环样细胞分化，重塑细胞外基质，形成良好的愈合界面的关键技术。（2）阐明RhoA/ROCK信号通路的激活是Fib-Gen生物胶传导应力促进MSC向纤维环样细胞分化的重要分子机制。
二、研究内容
（1）应力刺激对MSC向纤维环样细胞分化的影响： a．从细胞水平研究应力刺激对MSC向纤维环样细胞分化的作用。免疫组化、q-PCR对细胞表型进行鉴定；免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态及细胞外基质的组成与结构。b．从动物水平研究应力刺激对MSC向纤维环样细胞分化的作用。免疫组化、q-PCR细胞表型进行鉴定；免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态及细胞外基质的组成与结构。
（2）RhoA/ROCK信号通路在MSC向纤维环样细胞分化中的作用： a．体外稳定培养MSC，分别采用选择性抑制、RNA干扰及基因过表达技术，探讨RhoA/ROCK 信号通路对MSC向纤维环样细胞分化的作用。 b．免疫组化和q-PCR对细胞表型进行鉴定；免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态及细胞外基质的组成与结构。pull-down、western-blot检测RhoA活性，q-PCR、western-blot检测ROCK、Sox-9基因转录、蛋白表达和蛋白磷酸化水平。
（3）应力刺激促进MSC向纤维环样细胞分化的分子机制：a．对含MSC Fib-Gen胶施加不同的应力刺激。pull-down、western-blot检测RhoA活性；q-PCR、western-blot检测ROCK、Sox-9、Col-1、Col-2、Aggrecan基因表达、蛋白表达和蛋白磷酸化水平。b．采用选择性抑制、RNA干扰及基因过表达技术，明确应力刺激对MSC向纤维环样细胞分化的主要分子机制。q-PCR、western-blot检测Sox-9、Col-1、Col-2、Aggrecan基因表达、蛋白表达和蛋白磷酸化水平的影响。
（4）应力刺激应用于组织工程修复纤维环损伤疗效评估：a．构建大型动物（猪）纤维环缺损模型，组织工程支架填塞缺损，采用MSC Fib-Gen胶粘附稳定组织工程断面与纤维环断面。 b．MRI、组织学染色评价断面愈合及椎间盘退变情况。pull-down、western-blot检测RhoA活性；q-PCR、western-blot检测断面组织中ROCK、Sox-9、Col-1、Col-2、Aggrecan基因转录、蛋白表达和蛋白磷酸化水平。
三、预期获得的成果及达到的水平
（1）理论成果：不同连接方式稳定纤维环损伤断面存在界面力学信号的差异，应力遮挡或无应力刺激不利于纤维环的愈合，力学稳定与力学刺激兼顾统一可以促进纤维环的愈合。适当的应力刺激可以促进MSC向纤维环样细胞定向分化，力学信号通过RhoA/ROCK信号通路调节MSC的分化及基因表达，产生与力学环境相适应的细胞外基质。（2）发表标注受本基金资助的论文6篇，其中SCI论文3-4篇。

◇ ：近三年在国内外核心期刊上发表学术论文情况
论文题目 刊物名称 刊物国家 收录情况 卷期 排名
Surgical repair of annulus defect with biomimetic multilamellar nano/microfibrous scoffold in a porcine model ournal of tissue enginerring and regenerative medicine 国内 SCI 1


◇ ：出版专著教材情况(注：在书名后注明教材或专著)
名称 类别 出版单位 日期 排名


◇ ： 成果获奖情况
成果名称 颁奖部门 等级 完成日期 证书号 排名
纤维环组织工程的建立 国家 未评等级 其他 1
椎间盘退变与营养途径的关系 国家 未评等级 其他 1
椎间盘退变的发病机理及中西医结合治疗研究 校厅 三等奖 科技进步奖 1



◇ ：主持重大工程设计情况
项目名称 任务来源 完成形式 完成日期 鉴定验收单位 主要结论 排名


◇ ：目前承担的主要项目
项目名称及下达编号 项目级别 项目来源 起讫时间 科研经费(万元) 本人承担任务
** 国家自然科学基金项目 国家级 201801-202112 53.00 项目负责人