海洋异养硝化菌株的快速筛选
王光玉, 孙洋洋, 陈雷, 张健
哈尔滨工业大学威海 海洋科学与技术学院, 264209 山东 威海
摘要:
目前尚缺乏有效地系统分离获得异养硝化菌的方法,为此,利用海洋养殖废水,采用前期自养后期异养的混养富集方法,获得具有异养脱氮能力的菌群.通过异养培养基分离获得纯菌株,利用特异性引物扩增分离菌株的氨单加氧酶(AMO)基因amoA和周质硝酸盐还原酶(NAR)亚基基因napA,快速筛选具有潜在异养硝化或异养硝化好氧反硝化能力的菌株.通过氮素转化试验确认菌株的氮代谢特性.共分离获得异养细菌22株,其中11株细菌amoA基因呈阳性,7株细菌amoA基因和napA基因同时显阳性,氮素转化试验证明9株细菌具有异养脱氮能力.
关键词: 混养富集 异养硝化细菌 好氧反硝化细菌 氨单加氧酶基因(amoA) 周质硝酸盐还原酶亚基基因(napA)
DOI:10.11918/j.issn.0367-6234.2012.12.011
分类号:X172
基金项目:哈尔滨工业大学科研创新基金资助项目(IMOQ10110001);威海市科技攻关计划项目(IMJQ01110012);博士启动基金资助项目(IMJQ10100025).
Rapid screening of marine heterotrophic nitrobacteria
WANG Guang-yu, SUN Yang-yang, CHEN Lei, ZHANG Jian
School of Marine Science and Technology, Harbin Institute of Technology at Weihai, 264209 Weihai, Shandong, China
Abstract:
Method of mixed culture,earlier autotrophic condition and later heterotrophic condition, was used to enrich heterotrophic nitrifying bacteria and aerobic denitrifying bacteria from marine aquaculture wastewater. Heterotrophic nitrifying bacteria and aerobic denitrifying bacteria were isolated and purified by the heterotrophic culture medium. Using the special PCR primers, the bacteria were rapidly screened by amplifying Ammonia monooxygenase encoding gene (amoA) and a subunit of periplasmic nitrate reductase (NAR) encoding gene (napA). Those bacteria were identified by the denitrifying test. 22 heterotrophic bacteria strains were isolated, 11 strains had the amoA gene, 7 strains had both of the two genes, and there were 9 strains which had nitrifying ability.
Key words: mixed culture enrichment heterotrophic nitrifying bacteria aerobic denitrifying bacteria amoA gene napA gene
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