2004–2005学年 第二 学期      基因工程原理     试题一．概念 （每小题3分，共30分）

1．  Plasmid                   6．Ligase

2．  Clone         .           7．Gene Library

3．  Vector                    8．Gene Engineering

4．  克隆位点                 9．转化

5．  复制位点                 10．重叠基因

二．改错题（正确的打√,错误的打×,并加以改正）

（每小题2分，共10分）

1. DNA连接酶可以连接gap缺口，不能连接nick裂口。

（                                                ）

2．柯斯质粒（Cosmid）载体含有λDNA 的粘性末端，还含有质粒复制子，能容纳比自身大的外源DNA。

(                                                ) 

3．质粒的构型中，线性L型是最简单的构型，因而，电泳时，泳动的速度最快。

(                                                 )                      

4．用乳糖基因插入失活法，筛选出白色噬菌斑为重组子。

（                                                ）

5．甲基化酶和DNA连接酶均需要引物。

（                                                ）

三、填空 （每空2分，共40分）

1．DNA酶足迹法（DNase foot printing）是一种用来检测被特定            特异性结合的DNA序列的位置及其核苷酸序列的结构特征的实验方法。

2．Western blot 、Southern blot、Northern blot将电泳分离的                、               和                 转移到滤膜上。

3．            由质粒和噬菌体结合而成的载体。

4. 依降解作用对象不同,核酸酶可分成                        和                。

5. 链终止法测定DNA序列的基本原理是利用DNA聚合酶，以单链DNA为模板，准确合成互补链，在合成过程中，掺入                  ，并结合上某种                      使链延长终止，产生许多                  的DNA片段，在PAGE胶上分离，放射自显影后，可在X光片上读出DNA序列。

6．Plasmid依复制型可分为           型和           型，依接合转移能力可分为               型和             型。。

7．DNA片段的凝胶电泳回收常用             琼脂糖法。

8．噬菌体M13构建的克隆载体，常用于DNA            。

9．             酶：来源不同，靶子序列不同但产生相同粘性末端的限制酶。

10. 核酸分子杂交是用标记的DNA作              和要检测的待测样品进行分子杂交，可检测出与               具有同源性的核酸片段。

11. 转化率和供体DNA分子的大小有关, DNA分子量小, 转化率较             。

四、问答题（前两题各6分，最后一题8分，共20分）（外招生前三题各选两题）

1．PCR是一项什么技术？其基本原理怎样？

2．举例说明同聚物加尾法、人工接头法、衔接物法三者有何区别?

3. 试绘图说明F+、F-、Hfr和F’各代表什么含义。（内招生不做）

4．假设让你研制感染人的某种病毒基因工程疫苗。试设计基因工程基本程序，生产抗人的某种病毒疫苗，并指出供体、受体、载体和目的基因。（人的某种病毒表面抗原基因、质粒、大肠杆菌、核酸限制性内切酶、DNA连接酶等）

13．DNA连接酶封闭缺口(nick),不能连接裂口(gap)， 图示二者的区别。上册P138

答案：

6．  Gene Library就是一个含不同重组DNA的细胞集群或病毒集群，重组DNA分子所含的外源DNA来自某种特定生物的基因组或cDNA 每个细胞或病毒重组DNA中所含的外源片段是各不相同。

7．  凝胶阻滞测定的基本原理如何？（上册P114第1一4段）