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水传病原微生物PCR-纳米金显色快速检测方法
外文标题：Rapid detection of waterborne pathogens using PCR amplification and nanogold visualization
文献类型：期刊
作者：叶成松^[1]张胜华^[2]刘春林^[3]冯琳^[4]张洪武^[5]于鑫^[6]
机构：中国科学院城市环境研究所环境与健康重点实验室,厦门361021;辽宁师范大学化学化工学院,大连116029;中国人民大学环境学院,北京100872

年：2014
期刊名称：环境科学学报
卷：34
期：8
页码范围：2163-2168
增刊：增刊
收录情况：中文核心期刊要目总览中国科技核心期刊CSCD(CSCD:5203912)
所属部门：环境学院
语言：中文
ISSN：0250-3301
链接地址：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hjkxxb201408036.aspx
DOI：10.13671/j.hjkxxb.2014.0529
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基金：国家科技支撑计划; 国家高科技研究发展计划; 厦门市科技计划项目
关键词：纳米金;水传病原微生物;DNA检测;紫外可见光谱;PCR反应
摘要：水传病原微生物是腹泻等肠胃疾病发病的主要原因,而发展快速、有效的检测方法对于控制和减少该类微生物的传播风险十分重要.因此,本文研究了PCR反应结合不修饰的纳米金颗粒(Gold nano-particles,AuNPs)显色检测方法的最佳盐浓度、探针含量、PCR反应条件等,并从纳米金制备、病原菌种类、检测特异性等方面进行考核,确定了最优检测条件为:10 μL PCR扩增产物混合20 pmol探针,95℃反应5 min,55.5℃反应3 min后,40℃杂交10 min;此时,先后加入90μL实验用纳米金和一定浓度的PBS溶液,室温观察颜色变化.结果发现,纳米金溶液由红色变为紫色或近于无色为阳性结果,对应的吸光度值迁移出530 nm,以此可达到快速检测病原微生物的目的.
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