传统纯化工艺中,从发酵液中纯化聚赖氨酸包括离心、膜过滤、离子交换、脱色等流程(图1-A),过程复杂,回收率低。优化采用离子交换树脂纯化聚赖氨酸工艺后,虽然聚赖氨酸的纯度达到97.10%,但是回收率只有66.01%。而且,离子交换操作过程中产生的含盐废水等也带来了回收再利用等经济和环境问题。
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图1 (A)传统聚赖氨酸制备工艺流程图:(1) 新鲜发酵液,(2)6 M HCl,(3)6 M NaOH,(4)1 M HCl,(5)去离子水,(6)1 M NaOH,(7)0.25 M HCl,(8)40% 乙醇水溶液;(B)本研究中果胶法分离聚赖氨酸的方法
研究团队巧妙地设计出“沉淀-解聚-沉淀”等步骤,当果胶与聚赖氨酸质量比为8:1时,可从预处理的发酵液中100%分离聚赖氨酸,再利用聚赖氨酸和果胶的电荷特性进一步将果胶从聚赖氨酸中沉淀。利用这一方法,探索出从发酵液中提高聚赖氨酸回收率的工艺参数,具体工艺图如图1-B所示。另外,研究人员对得到的果胶-聚赖氨酸复合物进行了生物活性的实验,结果表明ABTS自由基清除能力的IC50从4.03 mg/mL降低到1.03 mg/mL,细胞存活率从53%提高到90%以上,聚赖氨酸抑菌浓度降低到原来1/3,均具有了显著改善。
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图2 研究实验结果
该项工作建立了一套全新的聚赖氨酸生产工艺,该生产工艺流程简单,绿色环保,其产品果胶-聚赖氨酸复合物具有更为突出的抑菌表现,相较于单纯的聚赖氨酸具有更加广阔的应用潜力和市场前景。
博士生常森林为论文第一作者,赵庆生副研究员和赵兵研究员为共同通讯作者。
论文链接:https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2021.107314。
(生物资源与健康产品工程研究部)