摘要： 【目的】二化螟Chilo suppressalis是中国和其他亚洲地区为害水稻的重要害虫。由于缺乏遗传学操作工具，对二化螟的功能基因组学研究受到严重限制。本研究的目的是借助一个标记基因ebony，在二化螟体内建立CRISPR/Cas9介导的基因编辑体系。【方法】以家蚕Bombyx mori ebony蛋白作为参考序列，通过TBLASTN程序在二化螟基因组数据库获得二化螟ebony基因的cDNA序列；通过PCR技术克隆二化螟ebony全长序列并进行生物信息学分析；运用qRT-PCR技术分析二化螟ebony基因在不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和雌雄成虫)和4龄幼虫不同组织(头、表皮、脂肪体、肠道和马氏管)中的表达模式；借助基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，把sgRNA/Cas9蛋白复合物显微注射到二化螟新鲜的卵内(产卵后2 h内)，靶向敲除二化螟ebony基因。【结果】克隆得到二化螟Csebony基因(GenBank登录号: MZ846208)的全长cDNA序列，开放阅读框长为2 586 bp，共编码861个氨基酸。Csebony蛋白质的分子质量为9.5 kD，理论等电点为5.10，且在N端没有信号肽。结构域分析显示，Csebony有3个保守的结构域。系统发育树显示，Csebony与玉米螟Ostrinia furnacalis的ebony亲缘关系最近。qPT-PCR结果显示Csebony基因在蛹期和头部高表达。敲除Csebony导致二化螟幼虫、蛹以及成虫黑色素沉积。【结论】本研究结果表明，Csebony参与了二化螟表皮颜色模式的调控；CRISPR/Cas9基因组编辑技术可在二化螟中有效应用。借助标记基因在非模式生物中快速建立CRISRP/Cas9基因编辑体系，可为二化螟的功能基因组学研究提供有价值的遗传学工具。
PDF全文下载地址:
http://www.insect.org.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6774
删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
敲除ebony基因导致二化螟体表黑色素沉积(英文)
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/基因 序列 技术 结构 遗传学
领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
优惠券领取后72小时内有效，10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材，产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频，无论您是考研复习、考证刷题，还是考前冲刺等，不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...考试优惠券 本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19低温对麦红吸浆虫滞育解除及蜕皮激素受体基因EcR和热激蛋白基因Hsp70和Hsp90表达水平的影响
摘要：【目的】本研究旨在明确破茧率和破茧所需时间作为典型的专性幼虫期滞育昆虫麦红吸浆虫Sitodiplosismosellana滞育解除指标的可行性，探讨蜕皮激素受体基因EcR和热激蛋白基因Hsp70和Hsp90在低温解除滞育中的作用。【方法】9月上旬采自田间的麦红吸浆虫滞育幼虫在低温(4℃)和自然 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03草地贪夜蛾海藻糖合成酶基因的克隆、时空表达谱及对温度胁迫的响应
摘要：【目的】本研究旨在通过克隆草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda的海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphatesynthase)基因SfTPS，分析其在草地贪夜蛾不同发育阶段、不同组织中的表达水平及不同温度胁迫时5龄幼虫中的相对表达量，为进一步探究TPS在草地贪夜蛾生长 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03菜粉蝶热激蛋白70(HSP70)基因的分子特性及其对杀虫剂胁迫的响应
摘要：【目的】明确菜粉蝶Pierisrapae热激蛋白70(HSP70)基因的分子特性及其对杀虫剂胁迫的响应，为探索菜粉蝶HSP70基因在抵御杀虫剂胁迫中的功能提供前期基础。【方法】利用同源检索方法，从菜粉蝶转录组数据中鉴定HSP70基因；使用生物信息学方法分析HSP70基因的分子特性；采用实时荧光 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03利用全长转录本优化柞蚕基因组注释(英文)
摘要：【目的】优化柞蚕Antheraeapernyi基因组注释，更好地扩展其在比较基因组学及品种改良研究中的应用。【方法】对柞蚕进行全长转录组测序分析；经全长转录本与参考基因组比对，鉴定新基因及新转录本，并对这些新基因和新转录本进行功能注释及长链非编码RNAs(lncRNAs)预测。利用大量的蛋白质 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03小菜蛾成虫喙管感器的超微结构及其神经元中枢投射
摘要：【目的】明确小菜蛾Plutellaxylostella成虫喙管感器的形态结构及感器神经元的投射。【方法】利用扫描电子显微镜观察小菜蛾成虫喙管结构和感器，利用神经回填技术和激光共聚焦显微镜观察喙管感器神经元在脑部的投射。【结果】小菜蛾成虫喙管上存在毛形感器(两种亚型)、腔锥形感器、锥形感器、刺形 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03应用EPG技术分析不同品种苜蓿对苜蓿斑蚜的抗性
摘要：【目的】明确苜蓿斑蚜Therioaphistrifolii对不同品种苜蓿Medicagosativa的取食行为，探明抗蚜因子和抗虫位点，筛选抗蚜苜蓿品种。【方法】利用刺吸电位技术(electricalpenetrationgraph,EPG)记录苜蓿斑蚜成蚜在10个苜蓿品种上的取食行为，并基于 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03双酚A(BPA)与黑腹果蝇雌激素相关受体(dERR)的结合模式及对其基因表达的影响
摘要：【目的】雌激素相关受体(estrogen-relatedreceptors,ERRs)属于核受体(nuclearreceptor,NR)超家族，在昆虫新陈代谢和能量转换调节中发挥重要作用。双酚A(bisphenolA,BPA)与昆虫生殖和神经系统疾病有关。本研究旨在探究BPA影响黑腹果蝇Dro ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03RNAi沉默王浆主蛋白1(Mrjp1)基因对意大利蜜蜂工蜂学习和记忆的影响
摘要：【目的】前期研究发现经吡虫啉处理的意大利蜜蜂Apismelliferaligustica(简称“意蜂”)工蜂学习能力下降，转录组学分析表明王浆主蛋白1(majorroyaljellyprotein1，MRJP1)基因在吡虫啉处理的蜜蜂脑中显著下调，MRJP1可能参与调控蜜蜂学习能力。本研究旨在 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03转基因杨树林下种植转基因棉花对转基因杨棉复合系统内节肢动物群落多样性的影响
摘要：【目的】转Bt基因棉花和转Bt基因杨树在我国已推广使用。本研究的目的是调查和分析不同转基因杨棉复合系统内地上节肢动物群落多样性变化，为转基因杨树大规模应用提供生态安全方面的数据。【方法】2019年4-10月，在河北任丘采取欧洲黑杨Populusnigra林下种植转基因棉花Gossypiumhi ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于线粒体基因组的华蝉族系统发育地位研究(半翅目: 蝉科)(英文)
摘要：【目的】本研究旨在明确无鼓膜发音器的华蝉族(Sinosenini)昆虫在蝉总科(Cicadoidea)的系统发育地位。【方法】依据在陕西宁陕采集的合哑蝉Kareniacaelatata成虫标本，对华蝉族的合哑蝉K.caelatata线粒体基因组进行测序、注释和生物信息学分析；并与蝉总科其他类群 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03
