摘要： 【目的】通过体腔显微注射非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA)过表达载体，研究注射后ncRNA在家蚕Bombyx mori幼虫不同组织中的表达情况，探索研究家蚕ncRNA功能的便捷方法。【方法】利用显微注射仪(玻璃显微注射针)在家蚕5龄第3天幼虫第7-8腹节褶皱处分别注射家蚕ncRNA Bm-15和Bm-152过表达载体piggyBac［A3-EGFP-A3-Bm-15］和piggyBac［A3-EGFP-A3-Bm-152］，注射48 h后提取家蚕幼虫头、胸、尾部、腹部背板、腹部腹板和丝腺总RNA，荧光定量PCR检测Bm-15和Bm-152在家蚕幼虫不同组织中的表达情况。【结果】采用玻璃显微注射针造成的创伤面小，注射后家蚕出现感染和死亡的比例低于10%。注射ncRNA Bm-15过表达载体后，在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-15的显著性过表达，头部中Bm-15表达量较注射piggyBac［A3-EGFP］空载体时上升了17倍，在其他4个组织中Bm-15表达量与正常饲养组家蚕对照相比变化不显著。注射Bm-152过表达载体后，同样在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-152的显著过表达，其中头部中的表达量较注射piggyBac［A3-EGFP］空载体时上升了6.6倍。腹部背板和丝腺中Bm-152过表达效果也较明显，分别是注射piggyBac［A3-EGFP］空载体时表达量的3.4和4.5倍。【结论】体腔显微注射ncRNA过表达载体可以实现ncRNA在家蚕头部中稳定过表达。本研究为后续研究神经相关ncRNA的功能提供了较好的思路和方法。
PDF全文下载地址:
http://www.insect.org.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6380
删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
利用体腔显微注射法实现非编码RNA在家蚕头部稳定过表达
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/组织 家蚕 神经 比例 幼虫
领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
优惠券领取后72小时内有效，10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材，产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频，无论您是考研复习、考证刷题，还是考前冲刺等，不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...考试优惠券 本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用
摘要：【目的】以西方蜜蜂Apismellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术——丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clearlipid-exchangedacrylamide-hybridizedrigidimaging/immunostaining/insit ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03灰茶尺蠖成虫触角及幼虫头部感器超微结构
摘要：【目的】明确灰茶尺蠖Ectropisgrisescens成虫触角及幼虫头部感器的种类、形态、数量和分布，以探讨灰茶尺蠖的行为机制。【方法】利用扫描电镜技术观察灰茶尺蠖雌、雄成虫触角和5龄幼虫头部感器的超微结构。【结果】灰茶尺蠖成虫触角上分布有8种感器，分别是栓锥形感器、耳形感器、毛形感器(Ⅰ- ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03蜕皮激素对家蚕脂肪体中BmATG8蛋白亚细胞定位与细胞核皱缩的调控
摘要：【目的】昆虫脂肪体是物质合成代谢、先天免疫的重要器官。ATG8蛋白的亚细胞定位是细胞自噬的主要指标之一，细胞核皱缩是细胞凋亡的形态标记之一，目前家蚕Bombyxmori中尚未在蜕皮和变态发育进程中对BmATG8蛋白的细胞生物学变化进行观察。本研究旨在同时检测家蚕脂肪体细胞中BmATG8蛋白亚细 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03食物中多不饱和脂肪酸在家蝇幼虫体内的富集与代谢及对其生长的影响
摘要：【目的】阐明家蝇Muscadomestica幼虫对食物中各种多不饱和脂肪酸的富集能力以及代谢转化情况，并探究各种多不饱和脂肪酸对家蝇幼虫生长的影响。【方法】在基础饲料中添加不同浓度(3%,6%和12%)的多不饱和脂肪酸(亚油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸和二十二碳六烯酸)饲养经过脱脂传代培养的家蝇 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交文库的构建
摘要：【目的】本研究旨在利用位点特异性重组技术(FullCoV)将中华蜜蜂Apisceranacerana幼虫膜蛋白cDNA连接到pPR3-N载体上，构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库。【方法】提取2-3日龄中华蜜蜂工蜂幼虫总RNA;分离mRNA后，在反转录酶的作用下合成幼虫膜蛋白cDNA ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03昆虫病原线虫Heterorhabditis beicherriana LF品系与Bt HBF-18菌株混用对华北大黑鳃金龟幼虫的防治效果
摘要：【目的】明确昆虫病原线虫HeterorhabditisbeicherrianaLF品系(LF)与苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHBF-18菌株(BtHBF-18)混用后对华北大黑鳃金龟Holotrichiaoblita幼虫的致病力的协同增效作用，为该害虫的防治提供新的 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03用于细胞水平家蚕转录调控元件研究的简单基础启动子的构建
摘要：【目的】本研究致力于构建一种能够在家蚕Bombyxmori细胞水平稳定表达的简单基础启动子，从而更准确地反映单一转录调控元件对基因启动子活性的影响，为研究家蚕乃至其他昆虫的基因转录调控奠定基础。【方法】本研究在本课题组已报道的能在家蚕细胞中稳定表达且基本不含上游转录调控元件的BmVgP78M启 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03家蚕幼虫BmToll9基因对肽聚糖和金黄色葡萄球菌的响应表达
摘要：【目的】Toll信号通路是昆虫中重要的免疫信号通路，其中Toll受体在保持Toll通路的正常免疫应答、抵抗外源病原体中起到关键的作用。本研究旨在探究肽聚糖和金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus对家蚕BombyxmoriToll受体基因BmToll9-1和BmToll9-2表达 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03黑水虻幼虫的耐饥力及饥饿幼虫复食后的生物学特性
摘要：【目的】旨在明确黑水虻Hermetiaillucens幼虫的耐饥力及饥饿幼虫复食后的发育、生殖力等生物学特性，为评估饥饿对黑水虻后续发育的影响并指导生产实践提供依据。【方法】将不同日龄或不同体重黑水虻幼虫进行不同时长的饥饿处理，测定和分析其耐饥力与日龄、百头重的关系；对7日龄幼虫进行不同时长的 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03小菜蛾成虫下唇须感器的超微结构及其神经元中枢投射
摘要：【目的】明确小菜蛾Plutellaxylostella成虫下唇须感器的形态结构及感器神经元的投射。【方法】利用光学显微镜观察和扫描电子显微镜观察下唇须结构和感器类型，利用神经回填技术和激光共聚焦显微镜观察下唇须感器神经元在脑部的投射。【结果】小菜蛾成虫下唇须共3节，其上存在B?hm氏鬃毛、钟形 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03
