人类巨细胞病毒（HCMV）流行广泛，危害严重，由于其严格的物种特异性限制，动物模型缺乏，严重阻碍了对其致病机制的研究及药物、疫苗的研发。本研究对树鼩（Tupaia belangeri）来源的原代真皮成纤维细胞感染HCMV后的细胞死亡现象进行了初步探索。首先，观察了感染后细胞病变和死亡情况，使用细胞增殖检测试剂盒测定了细胞活力；其次，对凋亡相关因子bax、bcl-2和未折叠蛋白反应相关因子chop、atf4、xbp1s转录水平的差异进行了逆转录荧光定量PCR检测与分析；然后利用免疫蛋白印迹技术检测并分析了主要病毒蛋白IE1、UL44和凋亡相关因子Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP的表达水平；最后结合膜联蛋白-V和碘化丙啶双染色法从生物化学角度对细胞死亡类型进行了鉴定。结果显示，细胞病变和死亡情况随着感染进程逐渐严重，细胞活力下降明显（P < 0.001）。感染上调bax、bcl-2、chop、atf4、xbp1s转录水平并且使bax与bcl-2转录水平呈明显拮抗趋势；感染同时上调Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表达和逐级剪切激活；病毒蛋白IE1、UL44可以上调至一个完整的病毒复制周期结束。综上，本研究指出HCMV跨物种感染树鼩原代真皮成纤维细胞可诱导细胞凋亡，并且与内质网和线粒体密切相关。
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人类巨细胞病毒感染树鼩原代真皮成纤维细胞诱导凋亡特性
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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