本研究旨在解析仔猪脑海马甘丙肽2型受体（galanin receptors type 2，GALR2）参与氧化应激调节的分子机制. 本研究基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型，采用实时PCR技术考察仔猪脑海马和大鼠海马神经元GALR2的表达变化. 并采用实时PCR、蛋白质印迹法及透射电镜技术进一步探索GALR2介导的信号途径和自噬之间的关系. 结果发现，与对照组相比，氧化应激仔猪脑海马与大鼠海马神经元GALR2的转录水平上调（P＜0.01；P＜0.05）. 同时，氧化应激神经元自噬相关基因LC3、ATG5与Beclin-1的转录水平均上调（P＜0.05；P＜0.05；P＜0.01）. 相关性分析结果显示，GALR2与LC3、ATG5及Beclin-1的转录水平正相关（P＜0.05；P＜0.05；P＜0.01）. GALR2特异性抑制剂M871的处理降低氧化应激海马神经元的活力（P＜0.01）、抑制氧化应激引起的自噬小体数量增多（P＜0.01）、自噬相关基因LC3、 Beclin-1及ATG5转录水平的上调（均P＜0.01）以及LC3-Ⅱ/β-actin比值与P62蛋白质水平的升高（均P＜0.05），表明伴随GALR2表达水平的抑制，被氧化应激上调的海马神经元自噬效应被抑制，从而削弱对氧化损伤的抵抗，降低了神经元的活力. 与此同时，M871的处理也降低了被氧化应激上调的JNK蛋白表达量（P＜0.01）及磷酸化水平（P＜0.05），表明JNK是GALR2调控海马神经元氧化应激的下游靶酶. 而JNK特异性抑制剂SP600125的处理则下调了被氧化应激上调的自噬标记蛋白LC3-Ⅱ/β-actin比值（P＜0.01），表明氧化应激状态下，抑制的JNK阻碍了神经元中上调的GALR2对自噬信号通路的激活. 综上可见：氧化应激状态下，海马神经元中上调的GALR2可通过调节JNK信号途径激活细胞自噬途径，从而降低神经元的氧化应激损伤，保护神经元.
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甘丙肽2型受体对氧化应激海马神经元自噬的调控作用及机制研究
本站小编 Free考研考试/2022-01-02
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