二维码（扫一下试试看！） | | P-糖蛋白的核酸适配体筛选及应用研究 | | Research on Selecting of P-gp Aptamers and Its Application | | 投稿时间：2020-10-28 | | DOI：10.15918/j.tbit1001-0645.2020.192 | | 中文关键词:P-糖蛋白SELEX核酸适配体P-糖蛋白外排功能抑制剂 | | English Keywords:P-gpSELEXaptamersP-gp efflux functioninhibitor | | 基金项目:国家自然科学基金资助项目（81573693，81973572） | | | 摘要点击次数:84 | | 全文下载次数:66 | | 中文摘要: | | 基于SELEX技术筛选P-糖蛋白（permeability glycoprotein，P-gp）的特异性核酸适配体（aptamer，Apt），并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法、表面等离子体共振（SPR）法表征了Apt与P-gp的结合能力，采用与P-gp结合能力最强的Apt5在人结直肠腺癌细胞（Caco-2）、人脑微管内皮细胞（hCMEC/D3）两种细胞系上考察了对P-gp外排功能的抑制效果.筛选得到10条长度为81 bp的P-gp核酸适配体，结合能力大小顺序为：Apt5>Apt8>Apt1>Apt4>Apt6>Apt10>Apt7>Apt2>Apt9>Apt3.Apt5使hCMEC/D3及Caco-2细胞内罗丹明123的蓄积量分别增加了40.77%（P<0.01），32.39%（P<0.05），能潜在抑制P-gp的外排功能.本研究首次报道了P-gp的多条核酸适配体，与P-gp有较强的结合能力，并能抑制P-gp的外排功能，有望成为P-gp的潜在新型抑制剂. | | English Summary: | | The SELEX technology was used to select aptamers (Apt) of permeability glycoprotein (P-gp). The enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and surface plasmon resonance (SPR) methods were used to determine the affinity between Apts and P-gp. Apt5 was chosen to evaluate the inhibitory effect on P-gp efflux function with immortalized human brain capillary endothelial cells (hCMEC/D3) and human epithelial colorectal adenocarcinoma cells (Caco-2). As a result, ten of 81bp Apts were selected. The affinity order of Apt was Apt5>Apt8>Apt1>Apt4>Apt6>Apt10>Apt7>Apt2>Apt9>Apt3. Further research showed that Apt5 significantly increased the cellular accumulation of rhodamine 123 both in hCMEC/D3 and Caco-2 cells, with a fold of 40.77% (P<0.01) and 32.39% (P<0.05), respectively, which indicated that Apt5potentially inhibited the efflux function of P-gp. In present study, several Apt of P-gp are presented, which had high affinity with P-gp and could inhibit P-gp efflux function. These Apts might be potential novel P-gp inhibitor. | | 查看全文查看/发表评论下载PDF阅读器 | |
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