二维码（扫一下试试看！） | | 多反应监测结合重组蛋白和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路进行蛋白质相对定量的新方法 | | Determination of the Abundance Proteins of Adipose Synthesis and β-Oxidation Using 18O Isotope Labeled and QconCAT Protein Combined with Multiple Reaction Monitoring Mass Spectrometry | | 投稿时间：2016-11-19 | | DOI：10.15918/j.tbit1001-0645.2017.增刊1.006 | | 中文关键词:定量串联体蛋白QconCAT18O同位素标记多反应监测 | | English Keywords:concatamers of Q peptides18O labelingmultiple reaction monitoring | | 基金项目:国家自然科学青年基金资助项目（21402008） | | | 摘要点击次数:843 | | 全文下载次数:282 | | 中文摘要: | | 建立了多反应监测结合肽段串联体蛋白（concatamers of Q peptides，QconCATs）和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路的蛋白质进行相对定量的新方法.挑选待检测蛋白的特异性肽段构建QconCAT质粒并将其转化导入大肠杆菌体系后进行表达.通过优化对QconCAT蛋白的酶切条件及考察18O标记效率.建立脂肪合成代谢通路蛋白多反应监测的蛋白质相对新定量方法，并对肥胖大鼠与正常大鼠脂肪代谢通路的蛋白质进行定量分析.结果发现脂肪合成通路的丙二酸单酰辅酶A-ACP转移酶，烯酰-ACP还原酶表达量均有显著上升（P<0.05）.该结论与之前报道肥胖相关的文献结果吻合，证明了本方法在定量生物样品应用中的可靠性. | | English Summary: | | A novel method using QconCAT protein combined with 18O-labeling technique and multiple reaction monitoring mass spectrometry was established to quantify proteins involved in the pathway of adipose synthesis and β-oxidation.Firstly,the QconCAT proteins were constructed,and expressed in Escherichia coli.The digestion and the 18O labeling efficiency were optimized.Secondly,the novel method of quantifying adipose synthesis and β-oxidation was developed.Lastly,target proteins of obesity and control groups were quantified by MRM.The results showed that the abundance of the enoyl ACP reductase and malonyl-COA ACP transferase increased significantly in the obesity group with P<0.05.It is consistent to previous reports and means the method had its reliability to analyze the biological sample. | | 查看全文查看/发表评论下载PDF阅读器 | |
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