中国科学技术大学工程科学学院微纳米工程实验室在单颗粒/细胞捕获研究领域取得重要进展。他们提出使用实时飞秒激光双光子光刻技术,成功实现了单颗粒或细胞的捕获,该技术还可以实现可控多颗粒或细胞团簇的实时捕获,用于细胞通讯或颗粒之间的相互作用研究,有望极大地推动细胞捕获研究领域的发展。该成果以“Real-timetwo-photonlithographyincontrolledflowtocreateasingle-microparticlearrayandparticle-clusterarrayforoptofluidicimaging”为题,发表在微流控领域国际顶级期刊LabonaChip上[LabonaChip18,442-450(2018)],并被选为insidebackcover封面。同时被NaturePhotonics以“Instanttrapformation”为题亮点报道[NaturePhotonics12,65(2018)]。
在单细胞分析研究中,捕获目标细胞是实现单细胞分析的第一步。微流控芯片具有传统实验方法所不具备的一些优点,包括超低的试剂消耗、高集成度、高自动化程度、高效率、环境友好、微型化、可携带、低成本以及操控简单等,尤其在操作微量流体方面有着独特的优势,已经被广泛研究并应用于单细胞捕获领域中。其中,基于微流控的捕获阵列方法是实现细胞或者颗粒捕获分离最简单、最常用的方法。然而,目前的微捕获阵列面临着几个难题:1.由于微捕获结构会增大捕获单元的阻力,使得大部分的颗粒和细胞绕过捕获结构,从而导致极低的捕获效率(低于10%);2.传统的捕获结构都是预先在微流控芯片中加工出微捕获结构,无法实现针对目标结构尺寸和几何结构的实时可调控性;3.同时捕获可控的颗粒团簇很难实现。
图1实时飞秒激光双光子光刻用于100%颗粒或细胞捕获
该工作首次报道了结合可控流体的实时飞秒激光双光子光刻技术,通过快速加工微柱结构实现了100%颗粒或细胞的单捕获。研究团队首先设计制造了一定高度的微流控芯片,向芯片中通入包含有目标微颗粒或细胞的光刻胶或水凝胶;通过图像实时观测筛选目标颗粒,然后快速控制液体停流;使用飞秒激光在目标颗粒或细胞周围加工微柱阵列;最后洗掉光刻胶或水凝胶,得到目标结构用于后续单细胞分析。单细胞或颗粒的捕获效率接近100%,且捕获目标的几何尺寸和形状实时可调,另外还可以实现可控数目的颗粒团簇的捕获。
NaturePhotonics杂志副主编NoriakiHoriuchi在news&views专栏评述该项工作:该研究组提出了一个新的捕获策略——实时流体控制的飞秒激光双光子光刻技术,该技术能够有效在原位捕获目标颗粒;该工作相比于传统的微捕获阵列方法,具有很多优点:首先,捕获效率大幅度提升,接近100%,且单细胞捕获时间仅仅为400ms;其次,可以根据目标颗粒/细胞的尺寸和几何形状实时调控捕获结构,从而提高了该方法在多种细胞中捕获目标细胞的精确度;最后,该方法可以实现任意的单细胞捕获图案以及可控团簇细胞或颗粒的捕获;该技术有望在单细胞分析、光流体以及细胞计数领域中获得应用。
工程科学学院微纳米工程实验室长期从事飞秒激光微纳加工用于粒子/细胞捕获的研究,在微结构加工和微物体捕获方面具有良好的工作基础和积累。在前期工作中利用毛细力自组装方法加工了长管道结构[Small13,1603957(2017)],利用微管结构捕获微颗粒和细胞并用于细胞培养[Small13,1701190(2017);Opt.Express25,8144(2017)],利用全息方法快速加工了微柱结构组装体和微流体分选捕获器件[Adv.Funct.Mater.27,1701939(2017)封面文章,Opt.Express25,16739(2017)]。
工程科学学院博士生许兵为论文的第一作者,吴东教授、胡衍雷副教授为论文的通讯作者。这项工作得到了国家自然科学基金、中国科学院科研装备研制项目、中国博士后科学基金、中央高校基本科研业务费专项资金等项目的资助。
(工程科学学院、科研部)
LabonaChip论文链接:
http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2018/lc/c7lc01080j
NaturePhotonics链接:
https://www.nature.com/articles/s41566-018-0096-5
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中国科大在单细胞捕获研究领域取得重要进展_中国科学技术大学
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